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ACE2-1 血管紧张素转换酶2蛋白质标准品可作为血管紧张素转换酶 2 (ACE2) 受体的来源,用于冠状病毒刺突蛋白结合测定,并用于评估抗体介导的受体-刺突相互作用抑制。
ACE2-1 血管紧张素转换酶2蛋白质标准品中的ACE2蛋白被生物素化以促进蛋白质固定和/或亲和下拉纯化。ACE2-1中人ACE2蛋白的摩尔浓度、质量分数和质量浓度的参考值已建立,如表1所示。信息值ACE2-1中人ACE2蛋白的大小异质性见表2。一个单位的ACE2-1在Dulbecco磷酸盐缓冲盐水中含有50 uL的人ACE2。
ACE2-1 的参考值基于加拿大国家研究委员会 (NRC) 生成的数据中两种正交方法的组合结果。在蛋白质酸水解后,通过双同位素稀释 - 液相色谱法进行氨基酸分析 (AAA) -采用串联质谱 (LC-ID-MSIMS) 对 ACE2-1 中的 ACE2 蛋白进行赋值。此外,还进行了基于色氨酸和酪氨酸在 280 nm 吸光度的紫外可见分光光度法 (Uv-vis)。所有值的扩展不确定度 (U) 等于 U= kuc,其中 u。是根据 JCGM 指南 [1] 计算的组合标准不确定度,k 是两个的覆盖因子(k = 2.95 % 置信区间)。
ACE2-1 的信息值基于 NRC 生成的数据。血管紧张素转换酶 2 作为单体存在于溶液中,但可能发生非特异性蛋白质聚集成高阶寡聚体。 尺寸排阻液相色谱和紫外可见检测 (Lc-SEC-UV) 用于确定 ACE2-1 中人 ACE2 蛋白的尺寸异质性。表 2 中的信息值可适用于表 1 中列出的所有参考值。
编码
编码是指用于赋值的工具方法:
通过双同位素稀释法进行氨基酸分析 (AAA) - 液相色谱 - 串联质谱 (LC-ID-MS/MS) b 紫外-可见分光光度法 (Uv-Vis) c 尺寸排阻液相色谱紫外-可见分光光度法 (LC-SEC-UV ) 参考值参考值是非认证值,是基于可用数据对真实值的最佳估计。所述的扩展不确定性包括关于同质性和稳定性的信息,但可能不包括对不确定性的综合估计(表 1)。
信息价值
信息值是那些没有足够数据来提供不确定性综合估计的值(表 2)。
有可能的使用
ACE2-1 血管紧张素转换酶2蛋白质标准品以 50 uL 为单位分发,主要用于开发和验证冠状病毒刺突蛋白结合测定。
贮存
建议将材料储存在受控的低温环境中,例如大约 -80 °C 的冷冻箱。在 -20 °C 或 +4 °C 下短期储存是可以接受的,但材料在此类条件下的稳定性尚未得到证实严格评估。