NRC标准品 CRM-GTX2&3漆沟藻毒素的制备

NRC标准品 CRM-GTX2&3漆沟藻毒素的制备

从培养的塔玛亚历山大藻中提取N-氨基磺酰基甲状腺素-2和-3，并化学转化为GTX2和GTX3混合物，使用制备规模色谱法进行纯化[2]。将纯化的GTX2&3在真空下干燥并溶解在过滤的0.5mM HCI水溶液中以得到储备溶液。通过500 MHz质子核磁共振（NMR）光谱、LC-ox-FLD[3]（Figure 1）、LC-MSIMS[4]（Figure 2和Figure 3）、毛细管电泳紫外检测（CE-UVD）[5]和液相色谱化学发光氮检测（LC-CLND）[6]检查毒素的纯度。

在过滤（0.2 um）中制备CRM-GTX2和3-d溶液，并在pH 3.4下脱气0.5 mM HCl，并将其分配到预先填充氩气的琥珀安瓿中，然后立即火焰密封。每个安瓿含有约0.5 mL溶液。

NRC标准品 CRM-GTX2&3漆沟藻毒素同质性

从整个灌装系列中选择了代表性数量的CRM-GTX283-d安瓿，并通过LC-ox-FLD测量GTX2&3浓度。使用ANOVA评估数据。

NRC标准品 CRM-GTX2&3漆沟藻毒素稳定性

研究表明，GTX2和3溶液储存在+4°C的密封安瓿中，具有良好的长期稳定性，在一年内未观察到任何可检测到的分解。溶液在冰箱（-12℃或更低）中储存时也很稳定。已确定GTX2&3在室温下具有良好的稳定性，在分析方法的不确定度范围内一个月内未观察到任何可检测到的分解（LC-MS，单一溶液重复注射的RSD<1%；n=6）。

NRC标准品 CRM-GTX2&3漆沟藻毒素不确定性

考虑并量化了与CRM-GTX283-d表征相关的所有合理误差源。包括与所使用的两种分析方法相关的组合不确定度分量（Lehar）。总体不确定度估算（UcRw）包括与批次表征（uchar）、储存期间不稳定性（usab）和瓶间变化（usom）相关的不确定度[8-11]。表3列出了这些组件，并按如下方式组合和扩展：