NIBSC97/642百日咳博德氏杆菌抗血清（小鼠）1RR 标准品的使用

NIBSC97/642百日咳博德氏杆菌抗血清（小鼠）1RR 标准品的使用方法：出于实际目的，每个小瓶含有相同数量的抗血清。每个小瓶的全部内容物应完全溶解在0.5ml蒸馏水中，并在使用前保持溶液冷却（例如+4°C）。建议将溶液储存在-20°C或更低的温度下，不要立即使用。应避免反复冷冻和解冻。

NIBSC97/642百日咳博德氏杆菌抗血清（小鼠）1RR 标准品的小瓶不含抑菌剂，制剂不应假定为无菌。不应试图称量冷冻干燥粉末的比例。在NIBSC使用FDA报告的用于制备美国批次1的方法制备小鼠抗血清，不同的是使用5-8周龄的NIH小鼠代替FDA使用的CD-1菌株进行免疫。用于免疫的DTaP疫苗由Pasteur Merieux Connaught（加拿大）捐赠，据报道含有10微克/0.5毫升戊二醛灭活百日咳毒素（PT）、5微克/0.5 ml丝状血凝素（FHA）、3微克/0.5 l百日咳肌动蛋白（PRN）、5毫克/0.5毫升菌毛混合物（Fims，2型和3型）、，15Lf破伤风类毒素和15Lf白喉类毒素以及1.5mg AlPO3作为佐剂。用0.5ml 1:10的疫苗在0.85%NaCl中的稀释液在三周内腹腔内免疫小鼠三次。第三次免疫三周后，动物终末放血，合并血清样本。免疫球蛋白通过硫酸铵沉淀部分纯化，再溶解并用0.01M磷酸盐缓冲盐水（PBS）透析，pH7.4。PBS中的免疫球蛋白溶液在PBS中10%正常小鼠血清中稀释1:10。将0.5ml等分溶液分配到玻璃瓶中，编号为97/642，在真空下冷冻干燥，密封并在-20°C的黑暗中储存。

对于ELISA平板上的初始稀释，建议将该溶液稀释1/50-1/100。然而，这可能因个别实验室而异。

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