NIBSC18/164国际标准品ATDB102基因组材料的使用:
重构前,不应尝试称量冻干材料的任何部分
a、 按照上文第6节所述打开安瓿。
b、 在室温下用100μl无核酸酶水重新配制冻干材料。
c、 使用移液管将样品转移到无核酸酶试管中,确保收集到最大可用体积。
d、 让材料在室温下复原1小时,并用移液管充分混合。现在,1x Tris-EDTA缓冲液中的DNA浓度约为50ng/µl,但建议在使用前使用自己的定量方法进行确认。不应担心材料中可能出现白色斑点。
e、 该材料可用作野生型对照和优选的稀释剂,以产生材料18/118和18/130的任何选择的变异百分比的标准品(2019年HCT 15和MOLT-4癌症基因组第一国际标准);有关如何将其用作稀释剂的详细信息,请参见相关的使用说明。如果没有足够的材料18/164可用于进行稀释,可将替代的野生型gDNA与材料18/1164对齐并用作稀释剂,即应确认为二倍体,PIK3CA c.1633G>A(E545K)、TP53 c.916C>T(R306*)、NRAS c.34G>T(G12C)、PTEN c.795delA(K267fs*9)和MAP2K1/MEK1 c.199G>A(D67N)变体的野生型和PIK3C、TP53、NRAS的纯合野生型,PTEN、MAP2K1/MEK1。
f、 将所需量添加到化验中。材料可以进一步稀释(用无核酸酶水或合适的缓冲液),以达到适合您的检测的DNA浓度。
g、 一级和二级标准应在同一测定中进行分析,以便为二级标准赋值。
NIBSC18/164国际标准品ATDB102基因组的DIN安瓿瓶有一个“容易打开”的彩色应力点,窄的安瓿柄与宽的安瓿体连接在一起。市场上有各种类型的安瓿破瓶器。要打开安瓿,轻轻敲击安瓿以收集底部(贴有标签)端的材料,并遵循安瓿断路器提供的制造商说明。
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